考马斯亮蓝染色?考马斯亮蓝染色洗脱液配制

大家好,如果您还对考马斯亮蓝染色不太了解,没有关系,今天就由本站为大家分享考马斯亮蓝染色的知识,包括考马斯亮蓝染色洗脱液配制的问题都会给大家分析到,还望可以解决大家的问题,下面我们就开始吧!本文目录考马斯亮蓝染色洗脱液配制考马斯亮蓝染色液要经常更换吗

大家好,如果您还对考马斯亮蓝染色不太了解,没有关系,今天就由本站为大家分享考马斯亮蓝染色的知识,包括考马斯亮蓝染色洗脱液配制的问题都会给大家分析到,还望可以解决大家的问题,下面我们就开始吧!

本文目录

  1. 考马斯亮蓝染色洗脱液配制
  2. 考马斯亮蓝染色液要经常更换吗
  3. ponceau染色法
  4. sds-page电泳后,用考马斯亮蓝直接染色和做wb的目的有何不同
  5. 500毫升考马斯亮蓝怎么配

考马斯亮蓝染色洗脱液配制

考马斯亮蓝染色洗脱液是是用溶剂洗脱考纳斯亮蓝的溶液,配方如下:

考马斯亮蓝脱色液:1L

乙醇:50ml

冰乙酸:100ml

蒸馏水:850m

考马斯亮蓝染色液要经常更换吗

倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。

ponceau染色法

丽春红(PonceauS)也称猩红,可以用于PVDF膜、硝酸纤维素膜(nitrocellulosemembrane)和醋酸纤维素膜(celluloseacetatemembrane)上的蛋白的检测。丽春红带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合,从而形成红色的条带。丽春红染色的灵敏度不及考马斯亮蓝染色。

丽春红对蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸馏水,PBS或其它适当溶液洗去。因此,蛋白质N端测序时将SDS-PAGE胶上的蛋白转移到PVDF膜,用丽春红染色后将目的条带切下用于测序。

注意:丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。

使用说明

将PVDF膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在丽春红染色液中,摇动5-10分钟或更长时间;取出印迹膜,用蒸馏水,PBS或其它适当溶液漂洗2-3次,可出现清晰条带,记录结果;用蒸馏水,PBS或其它适当溶液漂洗2-3次,每次3-5分钟,去除丽春红,进行后续的WB检测。

补充:丽春红染色液也可以直接用来染PAGE胶,不过,在染色之前最好用甲醇-乙酸溶液浸泡一下PAGE胶,起到固定蛋白的作用。

丽春红染色液的配制

常用的丽春红染色液有两种:一种用乙酸配制,另外一种用三氯乙酸(TVA)和5-磺基水杨酸(5-Sulfosalicylicacid)配制。配制方法如下:

一、用乙酸配制成分:0.1%(w/v)丽春红,5%(v/v)乙酸,ddH2O。

4℃保存,不要冻上。也可以配成“0.2%(w/v)丽春红,3%(v/v)乙酸,ddH2O”。

二、用三氯乙酸和5-磺基水杨酸成分:2%(w/v)丽春红,30%的三氯乙酸,30%的5-磺基水杨酸。

sds-page电泳后,用考马斯亮蓝直接染色和做wb的目的有何不同

一个是用肉眼直接观测目的蛋白的大致位置,一个是通过转膜,一抗二抗结合,ECL显影得到目的蛋白的位置及大小

500毫升考马斯亮蓝怎么配

考马斯亮蓝G250的配制:称取100mg考马斯亮蓝G一250,溶于50ml90%乙醇中,加入85%的磷酸100ml,最后用蒸馏水定容到1000ml。此溶液在常温下可放置一个月。

考马斯亮蓝100ml:取10mgG一250,溶于5ml的95%乙醇中,此时溶液为蓝色,再加入了10ml的85%的磷酸,溶液为血红色,可是加水定容到100ml时又成为了蓝色。

觉得有用点个赞吧

考马斯亮蓝染色和考马斯亮蓝染色洗脱液配制的问题分享结束啦,以上的文章解决了您的问题吗?欢迎您下次再来哦!

本文内容由互联网用户自发贡献,该文观点仅代表作者本人。本站仅提供信息存储空间服务,不拥有所有权,不承担相关法律责任。如发现本站有涉嫌抄袭侵权/违法违规的内容, 请发送邮件至 1553299181@qq.com 举报,一经查实,本站将立刻删除。
如若转载,请注明出处:https://xun.sztxc.cn/87329.html